Adli ve klinik laboratuvarlar biyolojik numuneyi kromatografiye vermeden önce küçük hacimli aktarma, standart ekleme ve temizleme adımlarını çoğunlukla elle yapar. ePrep bu işi iki yayımlanmış notta anlatır. Bu sayfa o notların kaydıdır.
Sekiz bileşen
96-10006 notundaki karışım atenolol, kafein, asebutolol, propranolol, dekstrometorfan, ketokonazol, verapamil ve tolbutamiddir. Bireysel stoklar 1000 ppm’dir. Karışık stok 100 ppm’dir.
Kartuş µSPEed C18RPS, 3 µm / 120 Å, parça no 01-10110’dur. Aktive metanol, şartlama ultra saf sudur. Her numune yeni kartuş kullanır.
Sulu kalibrasyon 2, 1, 0.2, 0.1, 0.02 ve 0.002 ppm’dir. Serum denemesi 0.02 ppm spike ile yapılır. Yükleme, yıkama ve elüsyon hacimleri notun B ve C yöntemlerindedir. Ham kan yüklemesi 250 µL olarak yazılmıştır. Kan için ayrı geri kazanım tablosu notta yoktur.
Ölçüm, Thermo Vanquish UHPLC ve tek kuadrupol MS ile seçici iyon izlemesidir. Kolon Accucore Vanquish C18+, 100 mm × 2.1 mm, 1.5 µm, parça no 27101-102130. Hareketli faz A ultra saf su ve %1 formik asit, faz B asetonitril ve %1 formik asittir. Gradyan 0.3 mL/dk, 0. dakikada %95 A, 8. dakikada %40 A. Kolon 25 °C, otomatik örnekleyici 8 °C, enjeksiyon 1 µL. UV geliştirme 254 nm’de yapılmış ve o tespit limiti 2 ppm bulunmuştur.
Not, sulu µSPE geri kazanımlarını genel olarak %100’e yakın diye özetler. DXM ve verapamil için yanıtın yüksek kaldığını, bunun yıkama veya düşük sinyaldeki pik şeklinden gelebileceğini yazar. 0.002 ppm noktalarının bir kısmı gürültüdedir. Verapamil ve ketokonazolün 1 ppm noktasında örnek hazırlama hatası olabileceğini ve R²’nin bu yüzden düştüğünü kendisi söyler. Yüzde tablo notun PDF’indedir; bu sayfa o tabloyu laboratuvar kabul kriteri diye kopyalamaz.
Kalibrasyon standardı
98-35041, ePrep ONE üzerinde kalibrasyon standardı hazırlamayı anlatır. Yazılımda hareket programlanmaz. Vial grupları ve görevler seçilir. Görevler değişken dağıtım, seri seyreltme, seri dağıtım ve hacme tamamlamadır. Karıştırma şırınga veya dest üstü vorteks ile yapılır.
Notun örnek iş akışı üç referans malzemeden stok ve altı noktalı seri üretir. Standart parametrelerle süre 19 dakikadır. Şırınga aralığı 10 µL–10 mL, hacim alt sınırı 1 µL olarak yazılır.
Aynı nottaki kafein denemesi adli matris değildir. 10000 ppm stoktan on adet 100 ppm kafein standardı hazırlanır. ePrep tarafında süre 18 dakika, çözücü 10 × 1 mL, hassasiyet %0.2 RSD’dir. Deneyimli analist 60 dakika, 10 × 100 mL ve %0.53 RSD; kursiyer 90 dakika, 10 × 100 mL ve %4.57 RSD yazılmıştır. Not, elle yapılan hacmin o laboratuvardaki cam malzemeye bağlı olduğunu ve tipik elle hazırlığın daha küçük balonda da yapılabildiğini ekler. İş akışının kendi çalışma süresi 10 dakikanın altındadır. 18 dakika, yöntemi yazma süresini de içerir.
Bu denemenin esrar kalıntı çözücü bölümü bu sayfaya alınmadı.
